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    高效液相色譜儀在使用時(shí)這些問(wèn)題一定要注意!

    2020-04-07

    高效液相色譜儀在使用時(shí)這些問(wèn)題一定要注意:

     

    高效液相色譜儀

     

    一、色譜柱中的流動(dòng)相會(huì )排干嗎?

    不少做色譜分離試驗的人遇到過(guò)這樣的情形:不慎未及時(shí)補充流動(dòng)相,泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干了,HPLC系統由此而停止工作了。如此情況是否會(huì )損壞色譜柱?泵是否已將色譜柱中所有流動(dòng)相都排干了?色譜柱還能使用嗎?事實(shí)上,如果泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干,并不會(huì )造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿(mǎn)了空氣,泵也不會(huì )將空氣排入色譜柱。因為泵只能輸送液體,而不能輸送空氣。相比之下,另一個(gè)更可能發(fā)生的情況是忘記蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。同樣,整個(gè)色譜柱干涸的情況不太容易發(fā)生,多半可能只是色譜柱兩端的幾個(gè)毫米變干了,因揮發(fā)掉所有溶劑是色譜柱變干需要相當長(cháng)的時(shí)間。即使色譜柱真的變干了,也不一定就不可救藥了??梢試L試用一種*脫氣的、表面張力低的溶劑沖洗色譜柱以除去氣體。較低的表面張力有助于浸潤填料表面;已脫氣的溶劑應該能夠溶解并去除滯留在填料中的氣體。色譜柱大約需要沖一個(gè)小時(shí)或更多的時(shí)間被*浸潤,恢復到正常狀態(tài)。

     

    高效液相色譜儀

     

    二、使用PEEK管路和接頭需要注意什么問(wèn)題?

    如果經(jīng)常需要改變流路或更換不同品牌的色譜柱,使用PEEK材料制成的管路和接頭會(huì )非常方便。PEEK管路容易連接;PEEK接頭不僅無(wú)需工具,手擰即可固定,而且容易調節錐箍之外的管路長(cháng)度,方便與不同品牌或規格的色譜柱相連接。

    使用此類(lèi)材料的管路需要注意的是:PEEK對鹵代烷烴和C4H8O的兼容性不好。雖然未觀(guān)察到上述溶劑溶解PEEK材料的明顯跡象,但PEEK遇到上述溶劑會(huì )變脆。另一個(gè)西藥考慮的因素是壓力限。不銹鋼管可耐受6000psi的壓力,但PEEK管只能耐受近4000psi。

    使用PEEK接頭時(shí)則無(wú)需擔心接頭耐溶劑性能,因為接頭幾乎或很少與溶劑直接接觸。但手擰固定的PEEK接頭壓力限低于不銹鋼管,因而壓力太高時(shí),可能會(huì )使接頭在管路上滑動(dòng)而產(chǎn)生死體積或漏液。

     

    高效液相色譜儀

     

    三、如何預防高效液相色譜儀液相泵的故障:

    要保持泵的良好操作性能,必須維護系統的清潔,保證溶劑和試劑的質(zhì)量,對流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾和脫氣.下面列出預防泵故障的幾項措施:

    1、用高質(zhì)量試劑和HPLC級溶劑;

    2、過(guò)濾流動(dòng)相和溶劑;

    3、脫氣;

    4、每天開(kāi)始使用時(shí)放空排氣,工作結束后從泵中洗去緩沖液;

    5、不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中;

    6、定期更換墊圈;

    7、需要時(shí)加潤滑油;

    8、查閱有關(guān)泵操作手冊中的其它建議。

    處于良好操作狀態(tài)的泵,應該能使色譜圖上的基線(xiàn)平穩;保留時(shí)間的重復性好。在等度洗脫時(shí)壓力波動(dòng)小于2%。梯度洗脫時(shí)壓力變化應是緩慢和平穩的。

     

    為了使故障發(fā)生后盡快排除,平時(shí)應常備密封、單向閥、泵頭裝置、各式接頭、保險絲等部件,以及更換工具。

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